實(shí)驗(yàn)室代測(cè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目

免疫熒光檢測(cè)(IFC)服務(wù)及相關(guān)生物學(xué)代測(cè)服務(wù)

價(jià)格：電議 型號(hào)：

原產(chǎn)地：中國(guó)大陸發(fā)布時(shí)間：2013/7/3 15:00:33

免疫熒光檢測(cè)(IFC)定義：將免疫學(xué)方法(抗原抗體特異結(jié)合)與熒光標(biāo)記技術(shù)結(jié)合起來(lái)研究特異蛋白抗原在細(xì)胞內(nèi)分布的方法。由于熒光素所發(fā)的熒光可在熒光顯微鏡下檢出，從而可對(duì)抗原進(jìn)行細(xì)胞定位。免疫熒光檢測(cè)(IFC)服務(wù)及相關(guān)生物學(xué)代測(cè)服務(wù)

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標(biāo)簽：免疫熒光 免疫代測(cè)

詳細(xì)內(nèi)容

本產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)，不得用于醫(yī)療或食用。

免疫熒光檢測(cè)(IFC)服務(wù)及相關(guān)生物學(xué)代測(cè)服務(wù)

免疫熒光檢測(cè)（IFC）

分類：免疫熒光檢測(cè)分直接法、間接法、夾心法和補(bǔ)體法。

一般試驗(yàn)方法：

直接法

將標(biāo)記的特異性熒光抗體，直接加在抗原標(biāo)本上，經(jīng)一定的溫度和時(shí)間的染色，用水洗去未參加反應(yīng)的多余熒光抗體，室溫下干燥后封片、鏡檢。

間接法

　　如檢查未知抗原，先用已知未標(biāo)記的特異抗體（抗體）與抗原標(biāo)本進(jìn)行反應(yīng)，用水洗去未反應(yīng)的抗體，再用標(biāo)記的抗抗體（第二抗體）與抗原標(biāo)本反應(yīng)，使之形成抗原—抗體—抗體復(fù)合物，再用水洗去未反應(yīng)的標(biāo)記抗體，干燥、封片后鏡檢。如果檢查未知抗體，則表明抗原標(biāo)本是已知的，待檢血清為抗體，其它步驟的抗原檢查相同。

直接法一般實(shí)驗(yàn)步驟：

　　1）滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上，10min后棄去，使標(biāo)本保持一定濕度。

　　2）滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液，使其完全覆蓋標(biāo)本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時(shí)間（參考：30min）。

　　3）取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸3-5 min，不時(shí)振蕩。

　　4）取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標(biāo)本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。

　　5）立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度，一般可用“+”表示：

　　（-）無(wú)熒光；（±）極弱的可疑熒光；（+）熒光較弱，但清楚可見；（++）熒光明亮；（+++ －－++++）熒光閃亮。待檢標(biāo)本特異性熒光染色強(qiáng)度達(dá)“++”以上，而各種對(duì)照顯示為（±）或（-），即可判定為陽(yáng)性。

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間接法一般實(shí)驗(yàn)步驟：

　 1）滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于已知抗原標(biāo)本片，10min后棄去，使標(biāo)本片保持一定濕度。

　　2）滴加以0.01mol/L，pH7.4的PBS適當(dāng)稀釋的待檢抗體標(biāo)本，覆蓋已知抗原標(biāo)本片。將玻片置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，37℃保溫30min。

　　3）取出玻片，置于玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗1-2次，然后按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸5min，不時(shí)振蕩。

　　4）取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標(biāo)本干燥，滴加一滴一定稀釋度的熒光標(biāo)記的抗人球蛋白抗體。

　　5）將玻片平放在有蓋搪瓷盒內(nèi)，37℃保溫30min。

　　6）重復(fù)操作3。

　　7）取出玻片，用濾紙吸去多余水分，滴加一滴緩沖甘油，再覆以蓋玻片。

　　8）熒光顯微鏡高倍視野下觀察，結(jié)果判定同直接法。

服務(wù)內(nèi)容

提供免疫熒光染色服務(wù)，并對(duì)染色后結(jié)果進(jìn)行顯微照相。

樣品要求

石蠟切片/冰凍切片/細(xì)胞爬片。
目的蛋白一抗。

終產(chǎn)品

染色后的切片；
每張切片提供一張照片；
實(shí)驗(yàn)報(bào)告。

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更新時(shí)間：2024/11/26 14:28:39

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